میکروسکوپ کانفوکال Confocal

میکروسکوپ کانفوکال Confocal

آنالیز میکروسکوپ روبشی هم کانون لیزری یا کانفوکال (confocal microscope)، از دسته میکروسکوپ های فلوئورسانس است که در آن از خاصیت فلوئورسانس نمونه به منظور تشکیل تصویر و عکس برداری از آن استفاده می شود. میکروسکوپ کانفوکال امروزه توجهات بسیاری را به خصوص در حوزه پزشکی و زیست فناوری به خود جلب کرده است. چنانچه جایزه نوبل شیمی سال ۲۰۱۴ به محققین به دلیل تولید دستگاه کانفوکال با وضوح بالا اهدا شد. نمونه مناسب به منظور تصویربرداری با آنالیز میکروسکوپ کانفوکال و یا کلیه میکروسکوپ های فلوئورسانس باید فلوئورسنت باشد.

تکنیک های متعددی برای تولید نمونه فلوئورسنت وجود دارد. مرسوم ترین تکنیک، لیبل کردن یا نشاندار کردن نمونه با یک رنگ فلوئورسنت است. برای سلول ها و نمونه های زیستی می توان از بیان یک پروتئین فلوئورسنت استفاده است. البته اگر خود نمونه دارای خاصیت ذاتی فلوئورسنت داشته باشد، مستقیماْ می توان از آن تصویربرداری کرد. رنگ‌های فلوئورسنت زیادی برای ایجاد خاصیت فلوئورسنت (اصطلاحا رنگ آمیزی) در ترکیبات زیستی وجود دارد. این رنگ‌ها مولکول‌هایی می باشند که خاصیت ذاتی فلوئورسنت دارند. این رنگ به ترکیبات زیستی چسبیده و خاصیت را به کل سیستم می دهند. تعدادی از رنگ‌ های مرسوم عبارتند از DAPI، Hoechst، DRAQ5 و DRAQ7. در زیر تصاویری گرفته شده با میکروسکوپ کانفوکال (confocal) نشان داده شده است.

میکروسکوپ کانفوکال در مقایسه با دیگر میکروسکوپ های فلوئورسانس توانایی بخش بندی نوری وجود دارد که در نتیجه تصاویر فلوئورسانس، وضوح بهتری دارند. میکروسکوپ کانفوکال درحقیقت روشی اپتیکی برای تصویربرداری است که رزولوشن و کنتراست اپتیکی تصویر را افزایش می­‌دهد. به ‌طوری که با قرار دادن pinhole در صفحه‌ی کانونی، نورهای خارج از فوکوس حذف می­‌شود. این قابلیت به میکروسکوپ کانفوکال این اجازه را می­‌دهد تا با اسکن کردن نمونه در عمق‌های متفاوت، تصویری از ساختار سه‌بعدی نمونه را تشکیل دهد.

همچنین این روش از میکروسکوپی به افزایش رزولوشن تصویر به‌خصوص در راستای عمق نمونه کمک می­‌کند. میکروسکوپ موجود علاوه ‌بر میکروسکوپی به روش کانفوکال، قابلیت میکروسکوپی فلوئورسانس و میکروسکوپی میدان روشن را نیز دارد. از قابلیت‌های این دستگاه امکان نفوذ به اعماق نمونه با رزولوشن و کنتراست بالا، امکان عکس‌برداری به‌صورت لایه‌ای (Z-Scan) و امکان تشکیل تصویر سه‌بعدی از ساختار نمونه است.

در مهامکس این خدمت به صورت ساعتی انجام خواهد گرفت. نکات لازم جهت آماده سازی نمونه را در بخش نکات لازم مشاهده کنید.